以下是?人補(bǔ)體因子H(CFH)ELISA試劑盒?的實(shí)驗(yàn)使用說明書核心內(nèi)容：

　　BS-0638人補(bǔ)體因子H(CFH)ELISA試劑盒

　　一、實(shí)驗(yàn)原理

　　采用?雙抗體夾心法?：

　　微孔板預(yù)包被抗人CFH抗體捕獲樣本中的CFH

　　加入HRP標(biāo)記的檢測抗體形成復(fù)合物

　　TMB顯色(藍(lán)色→黃色)，450nm測OD值，濃度與吸光度正相關(guān)

　　二、試劑盒組成

　　組分 規(guī)格(96T/48T) 保存條件

　　預(yù)包被微孔板 1×96孔/1×48孔 2-8℃

　　CFH標(biāo)準(zhǔn)品(凍干) 0.5mL×6管(0-40ng/mL) -20℃

　　HRP標(biāo)記抗體 6mL/3mL 2-8℃

　　TMB底物 9mL/6mL 避光4℃

　　20×洗滌緩沖液 25mL/15mL(需1:20稀釋) 室溫

　　三、樣本處理

　　血清/血漿?：3000×g離心10-20分鐘，避免溶血或脂血

　　組織勻漿?：生理鹽水研磨后離心取上清

　　保存要求?：-20℃分裝，避免反復(fù)凍融(≤3次)

　　四、操作步驟

　　平衡試劑?：所有組分室溫平衡20分鐘

　　標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶?：加0.5mL稀釋液溶解凍干標(biāo)準(zhǔn)品

　　加樣溫育?：

　　依次加入標(biāo)準(zhǔn)品/樣本50μL→檢測抗體50μL

　　37℃孵育60分鐘

　　洗滌?：手工洗板5次(每孔加滿洗滌液靜置1分鐘)

　　顯色?：加入TMB 100μL，避光反應(yīng)15分鐘

　　終止?：加終止液50μL，10分鐘內(nèi)測OD450nm

　　五、注意事項(xiàng)

　　靈敏度?：1.88-8.54ng/mL(不同品牌差異)

　　精密度?：板內(nèi)CV<10%，板間CV<15%

　　干擾因素?：避免細(xì)菌污染、反復(fù)凍融或劇烈震蕩樣本

　　失效判斷?：陰性對照OD值≥0.12需棄用

　　六、結(jié)果計(jì)算

　　以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)繪制曲線，樣本濃度需乘以稀釋倍數(shù)。建議使用生工生物或艾美捷科技等供應(yīng)商提供的分析軟件。

　　注：不同品牌試劑盒參數(shù)可能存在差異，請以實(shí)際隨貨說明書為準(zhǔn)。

　　注：以上資料僅供參考，具體詳情來咨詢技術(shù) 老師或品牌供應(yīng)商。

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