健那綠B(Janus Green B)是一種常用的線粒體專一性活體染色劑?。在生物學(xué)研究和教學(xué)中具有廣泛的應(yīng)用價值。
健那綠B不僅用于生物學(xué)研究和教學(xué)中觀察線粒體的形態(tài)和功能,還被用作結(jié)構(gòu)的有效探針和生物大分子的功能探針,有助于研究線粒體的結(jié)構(gòu)和功能以及與細胞生理學(xué)和疾病相關(guān)的問題
健那綠B染色后,觀察方法主要是通過光學(xué)顯微鏡進行高倍鏡觀察?。
?染色?:將待觀察的細胞或組織放入盛有適當(dāng)濃度健那綠B染液的培養(yǎng)皿或載玻片上,進行染色。染色時間根據(jù)細胞類型和組織厚度而定,一般為數(shù)分鐘至數(shù)十分鐘不等,直至線粒體被染成藍綠色?。
?制片?:染色后,將細胞或組織轉(zhuǎn)移到載玻片上,滴加適量的Ringer氏液或其他生理鹽水,以保持細胞的活性狀態(tài)。然后蓋上蓋玻片,避免氣泡產(chǎn)生,確保觀察時視野清晰?。
?觀察?:將制備好的裝片標(biāo)本放到光學(xué)顯微鏡下,先用低倍鏡找到形態(tài)和著色良好的細胞或組織區(qū)域。然后轉(zhuǎn)換高倍鏡,仔細觀察線粒體的形態(tài)和分布。在高倍鏡下,可以看到線粒體被染成藍綠色,而細胞質(zhì)則接近無色,從而清晰地觀察到線粒體的形態(tài)和動態(tài)變化?